大家好,今天来为大家解答关于分光光度计原理这个问题的知识,还有对于红外分光光度计原理也是一样,很多人还不知道是什么意思,今天就让我来为大家分享这个问题,现在让我们一起来看看吧!
1紫外可见分光光度计–原理及使用
基本原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
同时,不同的物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光度值,这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。
按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外—可见分光光度法。
2分光光度计实验中均以水为参比,为什么在有显色剂加入的情况下选择试剂溶…
参比溶液的选择:在分光光度计实验中,参比溶液是用来消除背景干扰、校正仪器误差和提高测量准确性的重要手段。通常选择水作为参比溶液,因为水在可见光范围内没有明显的吸收。但在有显色剂加入的情况下,由于显色剂本身可能对光有吸收,因此选择试剂溶液作为参比溶液更为合适。
所用的试剂有的含有铁(如盐酸等)也有吸光度,会对测量引入误差,若不用不含铁的蒸馏水,则这部分误差无法消除,故一般用蒸馏水,以扣除因试剂可能带来的误差。
消除溶液中其他不需要测定的物质的干扰。在各种分析中,为消除干扰,用与测定试样时完全一致的条件进行测定的溶液。测得结果称为空白值,应从试样测定结果中扣除,以此提高测定的准确性。
因为除了所需要测的铁以外,溶剂,其他离子,也会对光有一定的吸收,所以必须用空白试剂,作为参比,用样品所吸收的光度,减去空白溶液的吸光度,剩下的就是你要测的铁的吸光度了,不过这个就是分光光度计会自己做好的。
C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。使用范围 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。仪器 可见-紫外分光光度计。
3在吸光光度分析中为什么要用单色光
1、入射光 = 吸收光 十 透过光。于是,吸光光度法的根本是测定待测液及标液各自对特定波长的单色光的吸收程度,再根据朗伯一比耳定律进行计算。
2、根据分光光度法中应用光的吸收定律进行定量分析,重要前提为入射光为单色光,因为单色光是可见的,分光光度仪分析时都要求在规定的波长下测量,复合光不能测量。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的。
3、对该物质进行定性和定量分析的。特点不同:吸光光度法:因入射光是纯度较高的单色盯带光,故使偏离朗伯一比耳定律的情况大为减少,标准曲线直线部分的范围更大,分析结果的准确度较高。分光光度法:具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验。
4、详细来说,吸光光度法是一种定量分析,它利用物质对光的吸收特性来进行分析。这种主要依赖于比尔-朗伯定律,该定律描述了物质对单色光的吸收与物质的浓度及光程之间的关系。根据比尔-朗伯定律,当一束单色光通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比。
5、数值上等于吸光物质浓度为1mol·L-1液层厚度为1cm时溶液的吸光度,它是物质吸光能力的量度,可作为定性分析的参考和估计定量分析的灵敏度。根据定律推导可知,朗伯—比耳定律成立的前提是:①入射光为单色光;②吸收发生在均匀的介质中;③吸收过程中,吸收物质互相不发生作用。
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